Resumo: Os carcinomas de mama são classificados em subtipos para melhor alocação em diversos regimes terapêuticos. Porém, para um número expressivo de mulheres, o câncer de mama (BC) progride ou recidiva. Análises metabolômicas por Ressonância Magnética Nuclear (NMR) e Espectroscopia Massas (MS) no soro e tecidos de pacientes com câncer de mama poderiam contribuir para a compreensão das vias metabólicas envolvidas no diagnóstico e resistência à quimioterapia. Objetivos: 1) Correlacionar o perfil lipídico do plasma obtido por MS com aquele encontrado no tecido utilizando a abordagem de DESI-MSI de mulheres com BC especial e não especial; comparar os biomarcadores determinados por MS em mulheres com BC e grupo controle (direcionado) e 2) Determinar a sensibilidade, especificidade e acurácia de um conjunto de metabólitos identificados por NMR no soro pré-quimioterapia na predição da resposta à quimioterapia neoadjuvante (NACT) de mulheres com BC. Sujeitos e Métodos: Após aprovação do projeto pelo Comitê de Ética em Pesquisa da UNICAMP foram selecionadas amostras de tecido e soro das pacientes com BC arquivadas no Biobanco do Centro de Atenção Integral à Saúde da Mulher da Universidade Estadual de Campinas (CAISM-UNICAMP). Para o primeiro estudo foram selecionadas 28 amostras de tecidos e 20 amostras de plasma de 24 mulheres com BC ductal de subtipos especial e não especial e com 22 amostras de plasma de mulheres sem diagnostico de câncer. Para o segundo estudo foram selecionadas as amostras de sangue pré-tratamento de 80 mulheres com BC, submetidas à NACT. Resultados: Tanto o perfil lipídico do plasma detectado por MS quanto o perfil lipídico do tecido detectado por DESI-MSI puderam ser utilizados como métodos diagnósticos. Porém alguns indicadores de lesão tecidual não foram representados no plasma. Nessas mulheres cada matriz teve sua assinatura molecular própria, e não houve interposição dessas assinaturas do plasma e do tecido na mesma paciente. Alguns metabólitos como alanina e glutamina foram muito abundantes no soro das mulheres com BC independentemente da expressão de receptores hormonais (HR) ou da resposta à NACT. Já a metionina, asparagina, e glicina foram mais abundantes em mulheres com HR positivos, enquanto a betaína esteve mais abundante em mulheres com HR negativos. A arginina e o formato foram mais abundantes em mulheres resistentes à NACT, enquanto a leucina foi mais abundante em mulheres sensíveis. A leucina mostrou a maior correlação positiva com a quimiossensibilidade, como marcador isolado ou quando associada com a expressão dos marcadores imunohistoquímicos (HR, Ki67 e HER2). E por fim, em relação à acurácia dos modelos preditivos de resposta a NACT, os modelos incluindo leucina, glicina, mio-inositol, serina, colina, pantotenato, Gly3PC, alanina e histidina, associada aos marcadores moleculares (HR, HER2 e Ki67) mostraram uma sensibilidade, especificidade, e acurácia de 100%. Conclusão: tanto o perfil lipídico do plasma e do tecido puderam ser utilizados como métodos diagnósticos. Quando associado à expressão de HR, Ki67 e HER2, um conjunto de metabólitos foi capaz de predizer resposta histológica com 100% de acurácia em mulheres submetidas à NACT para BC Ver menos

Abstract: Invasive breast carcinomas are classified into subtypes for better allocation in different therapeutic regimens. However, for a significant number of women, breast cancer (BC) progresses or relapses. Metabolomic analysis by Nuclear Magnetic Resonance (NMR) and Mass Spectroscopy (MS) in serum and tissues of patients with BC could contribute to understanding the metabolic pathways involved in diagnosis and resistance to chemotherapy. Objectives: 1) To correlate the plasma lipid profile obtained by MS with that found in tissue using the DESI-MSI approach in women with special and non-special BC; to compare the biomarkers determined by MS in women with BC and control group (targeted) and 2) To determine the sensitivity, specificity and accuracy of a set of metabolites identified by NMR in pre-chemotherapy serum for predicting response to neoadjuvant chemotherapy (NACT) in women with BC. Subjects and Methods: The project was approved by the UNICAMP Research Ethics Committee. Blood and tissue samples of tissue and serum from BC patients were selected at the Biobank of the Centro de Atenção Integral à Saúde da Mulher da Universidade Estadual de Campinas (CAISM-UNICAMP). For the first study, 28 tissue samples and 20 plasma samples from 24 women with special and non-special subtype ductal BC and 22 plasma samples from healthy women were selected. For the second study, pre-treatment blood samples from 80 women with BC who underwent NACT were selected. Results: Both the plasma lipid profile detected by MS and the tissue lipid profile detected by DESI-MSI could be used as a diagnostic method. However, some tissue injury indicators were not represented in the plasma. In these women, each matrix had its own molecular signature, and there was no overlap of plasma and tissue signatures in the same patient. Some metabolites such as alanine and glutamine were very abundant in the serum of women with BC regardless of the expression of hormone receptors (HR) or the response to NACT. Methionine, asparagine, and glycine were higher in women with positive HR, while betaine was increase in women with negative HR. Arginine and formate were greater in women resistant to NACT, while leucine was higher in women sensitive to treatment. Leucine showed the greatest positive correlation with chemosensitivity, either as an isolated marker or when associated with the expression of immunohistochemical markers (HR, Ki67 and HER-2). Finally, regarding the accuracy of the predictive models of response to NACT, the models including leucine, glycine, myo-inositol, serine, choline, pantotenate, Gly3PC, alanine and histidine, associated with molecular markers (HR, HER2 and Ki67) showed a sensitivity, specificity, and accuracy of 100%. Conclusion: Both plasma and tissue lipid profile could be used as a diagnostic method. A set of metabolites associated to HR, Ki67 and HER-2 expression, could predict histological response with 100% accuracy in women submitted to NACT for BC Ver menos