Efeito do PMSF na incorporação de fluor e remineralização do esmalte dental
Paulo Edelvar Correa Peres
DISSERTAÇÃO
Português
T/UNICAMP P415e
Piracicaba, SP : [s.n.], 1997.
92f. : il.
Orientador: Jaime Aparecido Cury
Dissertação (mestrado)- Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piraciaba
Resumo: Fenilmetilsulfonilflúor (PMSF) é um inibidor de proteases amplamente utilizado em pesquisas. Entretanto, durante sua ação, ele libera íon flúor o qual pode ter efeitos indiretos em enzimas, na formação de película e no esmalte dental. Quarenta e nove blocos (4x4mm) polidos de esmalte bovino...
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Resumo: Fenilmetilsulfonilflúor (PMSF) é um inibidor de proteases amplamente utilizado em pesquisas. Entretanto, durante sua ação, ele libera íon flúor o qual pode ter efeitos indiretos em enzimas, na formação de película e no esmalte dental. Quarenta e nove blocos (4x4mm) polidos de esmalte bovino foram utilizados. Inicialmente, dureza superficial do esmalte (DSE) foi determinada, após o que os blocos foram submetidos a uma solução desmineralizante (ácido láctico 0,05 M, pH 5,0 , 50 % saturado em relação à hidroxiapatita e contendo carbopol 907 a 0,2 %) para provocar uma lesão superficial de cárie. A DSE foi novamente determinada e os blocos foram divididos casualmente em 5 grupos para serem submetidos aos seguintes tratamentos: I = Saliva humana estimulada (SHE) ; II = SHE contendo PMSF a 10,0 'mu'M ; III = SHE contendo PMSF a 50,0 'mu'M ; IV = SHE contendo PMSF a 100,0 'mu'M e V = SHE contendo 1,0 ppm F. Durante 12 dias estes blocos permaneceram, diariamente, 22h nas salivas de acordo com os tratamentos, e por 2h na solução desmineralizante (ciclagens de pH). As salivas foram trocadas 2x/dia e a solução desmineralizante após o 6° dia. A DSE (Knoop) foi novamente medida, sendo feitas sempre 05 indentações a cada 100 'mu'M de distância, com uma carga de 50 g por 5 seg, utilizando-se um microdurômetro Shimadzu HMV 2000. Flúor incorporado no esmalte (FIE) foi também determinado, removendo-se 05 camadas de esmalte com HCL 0,5 M e as análises de íon flúor foram realizadas com eletrodo específico Orion 96-09 e analisador de íons EA 940. Determinou-se também, a liberação de íon flúor do PMSF (100 'mu'M) pela ação da saliva. Os resultados mostraram que o PMSF liberou íon flúor e em 10 min/37°C a concentração na saliva aumentou de 0,078 para 1,732 ppm F. Calculou-se a % de recuperação da DSE (remineralização sendo os resultados (média + erro padrão) para os grupos de I a V, respectivamente de : 10,7 + 1,97 A; 30,8 + 2,90 B; 43,5 + 5,07 B,C ; 54,5 + 6,59 C; e 43,2 + 5,82 B,C. Os resultados de FIE na 1a camada foram: 2544,8 + 203,7 A; 6281,0 + 429,9 B; 13732,7 + 1372,8 C ; 13719,0 + 1552,1 Ce 11650,3 + 1394,2 C, sendo que médias seguidas de letras distintas difereJp estatisticamente (p <0,05). Concluiu-se que o PMSF libera íon flúor quando em contato com a saliva, o qual não só remineraliza e incorpora flúor no esmalte como poderá ter efeitos indiretos em outras pesquisas nas quais ele é utilizado com a finalidade de inibir enzimas proteolíticas
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Abstract: Phenylmethylsulfonylfluoride (PMSF) is a widely used protease inhibitor that by releasing fluoride may have indirect effect on enzymes, pellicle formation and dental enamel. The objective of this research was to study the effect of PMSF on enamel remineralization through saliva action....
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Abstract: Phenylmethylsulfonylfluoride (PMSF) is a widely used protease inhibitor that by releasing fluoride may have indirect effect on enzymes, pellicle formation and dental enamel. The objective of this research was to study the effect of PMSF on enamel remineralization through saliva action. Forty nine flat bovine enamel blocks (4x4mm) were used. Surface microhardness (SMH) was initially determined in the sound enamel. These enamel blocks were partially demineralized in 0.05 M lactic acid, 50% saturated hydroxiapatite sol. at pH 5.0 containing Carbopol 0.2%, during 16h at 37°C. SMH was determined again; the enamel blocks were randomly allocated in 5 groups and submitted to the following treatments: 1= Human Stimulated Saliva (HSS); II= HSS containing 10.0 'mu'M PMSF; III= HSS containing 50.0 'mu'M PMSF; IV= HSS containing 100.0 'mu'M PMSF and V= HSS containing 1.0 ppm F. The enamel blocks were submitted to a pH-cycling model for 12 days, kept 2h in demineralizing solution and 22h in HSS. The saliva was changed twice/day and the demineralizing sol. after the 6th day. The Knoop SMH was again determined. Enamel fluoride uptake was determined by removing 5 layers of enamel With 0.5 M HCL. Fluoride released from PMSF (100.0 'mu'M) through saliva action was determined. For the Knoop SMH analysis a microhardness tester SHIMADZU HMV -2000 was utilized and for the fluoride analysing, specific electrode ORlON 96-09 was utilized. The results showed that PMSF, releases fluoride and after 10 minutes at 37°C, the fluoride concentration in saliva increased significantly from 0.078 to 1.732 ppm F. The % of Knoop SMH recovery (mean + SE) was calculated; the results for the groups I to V were respectively: 10.7 '+ or -'1.97A; 30.8 '+ or -'2.90B; 43.5 '+ or -' 5.07B,C; 54.5 '+ or -' 6.59C; and 43.2 '+ or -' 5.82B,C. The results (mean '+ or -' SE) of enamel fluoride uptake (ppm) at the 1st layer were: 2544.8 '+ or -' 203.7A; 6281.0 '+ or -' 429.9B; 13732.7 '+ or -' 1372.8C; 13719.0 '+ or -' 1552.1C; and 11650.3 '+ or -' 1394.2C. Means followed by different letters are statistically significant (p<0.05). In conclusion, PMSF releases fluaride when in contact with saliva, which not only enhances remineralization and enamel fluoride uptake but may also have indirect effects on other researches where PMSF is used as protease inhibitor
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Efeito do PMSF na incorporação de fluor e remineralização do esmalte dental
Paulo Edelvar Correa Peres
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