Orientador: Glaucia Maria Pastore

Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos

Resumo: Seissentas e oitenta e nove linhagens de fungos foram isoladas de amostras de diversas regiões do Brasil, e testadas quanto à capacidade de hidrolisarem glicerídeos, através da ação de lipase extracelular. Destas linhagens quatro foràm pré-selecionadas como produtoras de lipase. Foram...

Resumo: Seissentas e oitenta e nove linhagens de fungos foram isoladas de amostras de diversas regiões do Brasil, e testadas quanto à capacidade de hidrolisarem glicerídeos, através da ação de lipase extracelular. Destas linhagens quatro foràm pré-selecionadas como produtoras de lipase. Foram encontradas duas linhagens identificadas como Aspergillus sp que apresentaram alta produção de lipase em meio de cultivo composto de fareIo de trigo e água. A lipase de .Aspergillus sp linhagem n° 1099, hidrolisa preferencialmente gordura de leite de cabra e não apresenta afinidade pelo substrato sintético p-nitrofenil-Iaurato. A lipase de Aspergillus sp linhagem n° 1068 hidrolisa preferencialmete gordura de côco, tem pequena atividade contra óleo de oliva e apresenta afinidade pelo substrato p-nitrofenil-Iaurato. Devido à sua maior atividade lipolítica, esta enzima foi selecionada dentre as duas para o estudo, de purificação enzimática. Esta lipase foi parcialmente purificada através de fracionamento com sulfato de amônio e coluna de DEAE-Celulose obtendo-se duas frações. As frações obtidas apresentaram o mesmo perfil bioquímico quanto ao pH e à temperatura ótima de ação enzimática. A Reação de esterificação entre ácido oleico e glicerol pela lipase de Aspergillus sp nOl068 foi examinada e verificou-se que a enzima esterifica o ácido oleico e glicerol, produzindo mono, di e triglicerídeos

Abstract: The screening of lipase producing filamentous fungi was perfonned including 689 strains of microorganisms which were isolated from samples of the several regions in Brazil. It was found that four strains produced hight activity of extracellular lipase.Two of them produced higher activity...

Abstract: The screening of lipase producing filamentous fungi was perfonned including 689 strains of microorganisms which were isolated from samples of the several regions in Brazil. It was found that four strains produced hight activity of extracellular lipase.Two of them produced higher activity of lipase. These strains were identified as Aspergillus sp. The lipase from Aspergillus sp was produced by solid state fennentation in medium containining wheat bran and water The lipase from Aspergillus sp strains nOlO99 hydrolysed preferentialy she-goat milk fat and did not hydrolysed the sinthetic substrate pnitrophenil-laurate. The lipase from Aspergillus sp strains nOlO68 hydrolysed preferentialy coconut oil and olive oil and hydrolysed the sinthetic substrate pnitrophenil-laurate.This enzyme showed the highest lipolytic activity. For Ws reason it was selected to be purified on column chromatography. This lipase was partly purified by fracionation with ammomum sulfate and DEAE-cellulose column.Two fractions were obtained in the end af the purification processo Both showed the same biochemical profile regarding pH and temperature of activity. Enzymatic esterification using glicerol and oleic acid by lipase from Aspergillus sp strains nOlO68 was also examined. It was found that the enzyme esterified the oleic acid and glicerol (\l1d that it produces monoglycerides, diglicerydes and triglicerydes