Orientador: Maricilda Palandi de Mello

Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia

Resumo: O defeito enzimático mais comum na síntese de esteróide é a deficiência da 21-hidroxilase da esteroidogênese da adrenal. A inibição da formação do cortisol faz com que o ACTH produzido na pituitária, estimule o cortéx da adrenal à super produção de androgénos. Este estado hormonal afeta o...

Resumo: O defeito enzimático mais comum na síntese de esteróide é a deficiência da 21-hidroxilase da esteroidogênese da adrenal. A inibição da formação do cortisol faz com que o ACTH produzido na pituitária, estimule o cortéx da adrenal à super produção de androgénos. Este estado hormonal afeta o desenvolvimento genético feminino indiretamente na diferenciação da genitália externa, em direção ao tipo masculino. Desde que o gene da enzima da 21-hidroxilase foi isolado (1984), deleção gênica, conversão gênica em larga escala, e microconversões foram determinadas como responsáveis pela doença. Neste trabalho, nós mostramos um estudo desse defeito genético em 23 famílias com um ou mais indivíduos afetados, tendo a forma clássica da Hiperplasia Congênita da Adrenal. O DNA de 30 pacientes foi analisado com três enzimas de restrição. As hibridizações com a sonda de cDNA da 21-hidroxilase e com o final 5' da sonda genômica de C4 revelaram deleção gênica em 9,5% (4/42) dos cromossomos afetados. A taxa de conversão gênica em larga escala foi de 19% (8/42), e uma padrão de hibridização normal foi observado em 62% (26/42) dos alelos afetados. A densitometria das autoradiografias foi usada para determinar a taxa relativa de intensidade do gene da 21-hidroxilase (CYP21B) pelo do pseudogene (CYP21A). As diferenças no fenótipo, a baixa frequência de deleção gênica, e a alta frequência de conversão gênica comparada com outros estudos em diferentes populações, indicou que a deficiência da 21-hídroxilase na população Brasileira pode envolver diferentes mutações moleculares

Abstract: The most common enzymatic defect of steroid synthesis is deficiency of the adrenal steroid 21-hydroxylase. Inhibition of the formation of cortisol results in an increased pituitary release of ACTH which in tum drives the adrenal cortex to overproduce androgens. This hormonal setting...

Abstract: The most common enzymatic defect of steroid synthesis is deficiency of the adrenal steroid 21-hydroxylase. Inhibition of the formation of cortisol results in an increased pituitary release of ACTH which in tum drives the adrenal cortex to overproduce androgens. This hormonal setting affects the development of genetic females by misdirecting the differentation of external genitalia towards the male type. Since the isolation of the gene encoding 21-hydroxylase enzyme in 1984, gene deletions, large gene conversions, and microconversions have been reported to be responsible for the disease. ln this work, we report a study of thes genetic defect in 23 families with one or more affected off spring diagnosed as having the classical form of congenital adrenal hyperplasia. The DNA from 30 patients was analyzed with three restriction enzymes. Hybridization with a 21-hydroxylase cDNA probe and the 5' end of a C4 genomic probe disclosed gene deletion in 9,5% (4/42) of the disease-related chromosomes. The rate of large gene conversion was 19% (8/42), and no abnormality in the hybridization pattem was observed in 62% (26/42) of the disease alleles. Densitometry of the autoradiographs was used to determine the ratio of the copy-number of the 21-hydroxylase gene (CYP21B) to the copy-number of its pseudogene (CYP21A). Differences in phenotype. The low frequency of gene deletion, and the high frequency of gene conversion compared with other studies in different popuIations indicated that 21-hydroxylase deficiency in the Brazilian population may involve different molecular mutations