Please use this identifier to cite or link to this item: http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/334551
Type: DISSERTAÇÃO DIGITAL
Degree Level: Mestrado
Title: Modulação do potencial osteoblástico-cementoblástico de clones de células mesenquimais indiferenciadas do ligamento periodontal via mecanismo epigenético   : Modulation of osteoblastic-cementoblastic potencial of mesenchymal stem cell clones from periodontal ligament by epigenetic mechanism  
Title Alternative: Modulation of osteoblastic-cementoblastic potencial of mesenchymal stem cell clones from periodontal ligament by epigenetic mechanism  
Author: Sacramento, Catharina Marques, 1991-
Advisor: Silverio, Karina Gonzales, 1976-
Abstract: Resumo: O ligamento periodontal (PDL) é constituído por populações de células heterogêneas com diferentes capacidades de diferenciação celular. Os mecanismos que regulam o comprometimento de células progenitoras mesenquimais do PDL com fenótipo osteo/cementoblástico ainda não são totalmente compreendidos. Neste trabalho, investigamos o efeito de um modulador epigenético na indução da diferenciação osteo/cementoblástica de clones de células progenitoras mesenquimais do ligamento periodontal humano com marcadores de superfície positivos para CD105 (hPDL-CD105+) que apresentam baixo potencial osteo/cementoblástico (LOP). Estes clones foram pré-tratados com 5-aza-2'-deoxycytidine (5-aza-dC) e Dimethyl Sulfoxide (DMSO) por 48 horas e submetidos a ensaios de mineralização (Vermelho de Alizarina e Xylenol Orange), análise dos níveis de transcritos para os genes ALP, ANXA2, ASPN, BMP2, FGF7, OCN, OPN e RUNX2 utilizando qRT-PCR e análise de metilação/hidroximetilação específica dos genes ASPN, BMP2 e FGF7. A análise dos dados revelou que, o pré-tratamento com 5-aza-dC aumentou a capacidade de deposição de matriz mineralizada de dois clones LOP (L1 e L2), porém diferentes respostas quanto à quantidade de produção de nódulos de cálcio foram encontradas, onde a mineralização de L1 e expressão de genes relacionada a osteo/cementogênese foi maior que L2. Os dados mostraram que o aumento dos níveis de transcritos de BMP2, FGF7 e ANXA2 pode levar a uma melhor resposta osteo/cementogênica, enquanto a elevação da expressão do gene ASPN pode bloquear o desempenho da diferenciação e mineralização de clones LOP. Além disso, níveis elevados de metilação/hidroximetilação de FGF7 estão correlacionados com uma baixa expressão de transcritos para este gene no clone com pouca resposta ao 5-aza-dC (L2). Ainda, o DMSO também aumenta a capacidade osteo/cementoblástica de clones LOP. Estes resultados mostraram que o pré-tratamento com 5-aza-dC e DMSO pode modular positivamente a diferenciação osteo/cementogênica de clones celulares hPDL-CD105+ com baixo potencial osteo/cementoblástico. Esses achados contribuem para uma melhor compreensão dos mecanismos complexos que podem levar as células progenitoras mesenquimais do PDL a regenerar os tecidos periodontais

Abstract: Periodontal ligament (PDL) is constituted by heterogeneous cell populations with different cell differentiation capacities. The mechanisms that regulate the involvement of mesenchymal progenitor cells of PDL with osteo/cementoblastic phenotype are not yet fully understood. Here we investigated the effect of an epigenetic modulator on the induction of osteo/cementoblastic differentiation of human periodontal ligament mesenchymal progenitor cell clones with positive surface markers for CD105 (hPDL-CD105+) and with low osteo/cementoblastic potential (LOP). These clones were pretreated with 5-aza-2'-deoxycytidine (5-aza-dC) e Dimethyl Sulfoxide (DMSO) for 48 hours and subjected to mineralization assays (Alizarin Red and Xylenol Orange), transcript levels¿ analysis of ALP, ANXA2, ASPN, BMP2, FGF7, OCN, OPN and RUNX2, using qRT-PCR and gene-specific methylation/hydroxymethylation analysis of ASPN, BMP2 and FGF7 genes. As results, 5-aza-dC enhances the capacity of mineralized matrix deposition of two LOP clones (L1 and L2), however different results regarding to the quantity of calcium nodules production was found, where L1 mineralization and osteogenic-related gene expression was greater than L2. The data show that the augmentation of BMP2, FGF7 and ANXA2 transcript levels may lead to a better osteo/cementogenic response, while the elevation of ASPN gene expression may block the mineralization performance of LOP clones. In addition, FGF7 methylation/hydroxymethylation high levels are correlated to low transcripts expression of this gene in the clone with poor response to 5-aza-dC (L2). Nevertheless, DMSO also enhances the osteo/cementogenic capacity of LOP clones. These results showed that pre-treatment with 5-aza-dC and DMSO can positively modulate the osteo/cementogenic differentiation of hPDL-CD105+ cell clones with low osteo/ emento-blastic potential. Those findings contribute to better understand the complex mechanisms that can lead PDL stem cells to regenerate the periodontal tissues
Subject: Diferenciação celular
Células clonais
Osteoblastos
Expressão gênica
Células-tronco
Language: Multilíngua
Editor: [s.n.]
Citation: SACRAMENTO, Catharina Marques. Modulação do potencial osteoblástico-cementoblástico de clones de células mesenquimais indiferenciadas do ligamento periodontal via mecanismo epigenético  : Modulation of osteoblastic-cementoblastic potencial of mesenchymal stem cell clones from periodontal ligament by epigenetic mechanism  . 2019. 1 recurso online (56 p.). Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba, Piracicaba, SP.
Date Issue: 2019
Appears in Collections:FOP - Tese e Dissertação

Files in This Item:
File SizeFormat 
Sacramento_CatharinaMarques_M.pdf1.64 MBAdobe PDFView/Open


Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.