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Type: TESE
Degree Level: Doutorado
Title: Efeitos da sepse nas etapas iniciais da sinalização insulinica em ratos
Author: Nunes, Andre Luiz Baptiston
Advisor: Saad, Mario José Abdalla, 1956-
Abstract: Resumo: A insulina estimula a atividade quinase do seu receptor, resultando na fosforilação de substratos citosólicos, entre eles o IRS-l, que se associam à fosfatidilinusitol 3-quinase, ativando-a. A resistência à insulina é uma condição fisiopatológica asssociada à sepse. Entretanto, o mecanismo molecular envolvido nesta situação de resistência não é conhecido. Neste estudo, examinamos a regulação das proteínas envolvidas nas etapas iniciais da ação insulínica em fígado, músculo, coração e gordura de ratos sépticos. Não foram observadas alterações na concentração do receptor de insulina dos ratos sépticos, em quaisquer dos tecidos estudados, determinado por "immunoblotting" com anticorpo anti-receptor de insulina após imunoprecipitação com anticorpo anti-IRS-l. O grau de fosforilação em tirosina da subunidade ß do receptor de insulina, que reflete sua autofosforilação, também não sofreu variações significativas, sugerindo a preservação da função do receptor de insulina nesta condição. Os níveis protéicos do IRS-l estavam preservados em três dos tecidos estudados: fígado, coração e gordura, e reduzido a 61±12% (p<0,05)no tecido muscular dos ratos sépticos. A incubação de amostras de tecido muscular previamente imunoprecipitadas com anticorpo anti-IRS-l com anticorpo anti-fosfotirosina, documentou uma consistente redução da fosforilação do IRS-l a 59±9% (p<0,05) dos valores observados no grupo controle, fato não observado nos demais tecidos. A exposição do "blotting" utilizado para determinação da fosforilação do IRS-l ao anticorpo anti PI3-quinase, após "stripping" da membrana de nitrocelulose, permite o estudo da associação IRS-l com a subunidade reguladora da PI3-quinase. Utilizando esse método, observamos uma redução tecido-específica da associação entre essas proteínas, reduzida a 56±7% (p<0,05)em músculo de ratos sépticos, consistente com a redução da fosforilação do IRS-l previamente observada. Estes dados sugerem que alterações nas etapas iniciais da transmissão do sinal insulínico estão presente em tecido muscular de ratos sépticos e podem contribuir para a resistência à insulina observada nesses animais

Abstract: Sepsis is known to induce insulin resistance, but the exact molecular mechanism involved is unknown. In the present study we have examined the levels and phosphorylation state of the insulin receptor and insulin receptor substrate 1 (IRS-l), as well as the association between IRS-l and phosphatidylinositol 3-kinase (pI 3-kinase) in the liver, muscle,heart and fat of septic rats by immunoprecipitation and immunoblotting with anti-insulin receptor, anti-IRS-l, anti-PI 3-kinase and anti-phosphotyrosine antibodies. There were no changes in the insulin receptor concentration and phosphorylation levels in any tissue of septic rats. IRS-l protein levels were decreased to 61 ±12%(p < 0.05) in musclebut not in other tissues of septicrats. In samples previously immunoprecipitated with anti-IRS-l antibody and blotted with antiphosphotyrosine antibody, the insulin-stimulated IRS-l phosphorylation levels in the muscle of septic rats decreased to 59±9% (p < 0.05) and insulin-stimulated IRS-l association with PI 3-kinase decreased to 56±7% in muscle(p < 0.05), but no changes were seen in liver, heart or fato These data suggest that there is a tissue-specific regulation of early steps of insulin signal transduction in septic rats, and the changes observed in muscle may have a role in the insulin resistance of these animaIs
Subject: Septcemia
Insulina - Receptores
Fisiologia
Language: Português
Editor: [s.n.]
Citation: NUNES, Andre Luiz Baptiston. Efeitos da sepse nas etapas iniciais da sinalização insulinica em ratos. 2001. 91f. Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas, Campinas, SP. Disponível em: <http://www.repositorio.unicamp.br/handle/REPOSIP/311228>. Acesso em: 31 jul. 2018.
Date Issue: 2001
Appears in Collections:FCM - Tese e Dissertação

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